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2022.1.11

近日,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)滿朝新教授團隊?將基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)法與16S rDNA序列分析法,對于乳酸菌鑒定的準確性以及微生物系統(tǒng)分類學(xué)相關(guān)分析結(jié)果進行比較,實驗結(jié)果表明:MALDI-TOF MS法鑒定乳酸菌具備快速、準確的優(yōu)勢,可作為一種快速、簡便、高效率的微生物鑒定技術(shù),應(yīng)用于多個領(lǐng)域之中。

相關(guān)研究已發(fā)表在《中國乳品工業(yè)》期刊上。

乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一類能利用可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的細菌的統(tǒng)稱,其在自然界分布極為廣泛,且絕大部分都是人體內(nèi)必不可少的、且具有重要生理功能的菌群。目前,乳酸菌作為國內(nèi)外常用的益生菌,在我國衛(wèi)生部2010 年4 月公布的《可用于食品的菌種名單》中,包括6 種雙歧桿菌、14 種乳桿菌、1 種鏈球菌,均屬于乳酸菌。

乳酸菌有著十分重要的經(jīng)濟價值。但由于其屬種較多,為更好的對其分類,使用快速、可靠的分類鑒定方法顯得尤為重要。

目前常用的乳酸菌鑒定方法是16S rDNA 序列分析法,然而該方法存在操作條件要求嚴格、花費時間較長、費用較高的問題,極大限制了其鑒定時效性,無法滿足乳酸菌快速、廉價及高通量的鑒定要求。

文章摘要?

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本研究通過將基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)法與16S rDNA序列分析法,對于乳酸菌鑒定的準確性以及微生物系統(tǒng)分類學(xué)相關(guān)分析結(jié)果進行比較,采用MALDI-TOF MS對本實驗所保藏的3株乳酸菌標準菌株,及由乳制品中分離得到的12株乳酸菌進行蛋白質(zhì)譜圖收集,比對譜圖特征峰對其進行鑒定及系統(tǒng)進行學(xué)分析;同時,進行16S rDNA提取并測序,得到分子生物化學(xué)水平鑒定,采用鄰近連接法對16S rDNA序列進行系統(tǒng)進化樹分析。

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?結(jié)果表明,MALDI-TOF MS法鑒定乳酸菌有著快速、準確的優(yōu)勢,可作為一種快速、簡便、高效率的微生物鑒定技術(shù),應(yīng)用于多個領(lǐng)域之中。經(jīng)MALDI-TOF MS與16S rDNA測序?qū)υ囼炈玫?5株乳酸菌鑒定,乳桿菌屬的2株微生物種水平鑒定結(jié)果存在偏差,其他13株鑒定結(jié)果一致;兩種方法所得到的數(shù)據(jù)均可得出聚類熱圖及系統(tǒng)發(fā)育樹,可確定為同一科水平,不同屬種水平微生物親緣距離與位置有一定差異。

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山東省青島市高新區(qū)松園路17號青島市工業(yè)技術(shù)研究院D區(qū)D2樓

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北京市北京經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)涼水河二街8號院13號樓A座4層

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